大腸桿菌分離機是基因工程菌發(fā)酵液或細胞培養(yǎng)液中提取生化物質的一個重要步驟,就是預處理和固液分離。其目的不僅在于分離大腸桿菌基因工程菌體和其他懸浮顆粒,還希望除去部分可溶性雜質和改變發(fā)酵液的性質,以利于后續(xù)的從澄清的發(fā)酵液中采用物理、化學的方法提取代謝產物,或從大腸桿菌基因工程菌出發(fā)進行細胞破碎、碎片的分離和提取胞內產物。大腸桿菌基因工程菌發(fā)酵液中雜質很多,其中有些雜質不僅直接影響產品質量和得率,同時對后續(xù)的提取和精制有很大影響,因此,在預處理時,必須采用適當方法使這些雜質沉淀,在固液分離時除去,以利于后面的提取和精制過程能順利進行。用于大腸桿菌基因工程菌發(fā)酵液固液分離的主要是離心分離,我們采用離心機高速旋轉產生的離心力來實現(xiàn)發(fā)酵液的固液分離,具有分離速度快、分離效率高,液相澄清度好等優(yōu)點;
大腸桿菌分離機的作用原理有離心過濾和離心沉降兩種。
①離心過濾:懸浮液在離心力場下產生的離心壓力,作用在過濾介質(濾網(wǎng)或濾布)上,使液體通過過濾介質成為濾液;而固體顆粒被截留在過濾介質表面,形成濾渣,從而實現(xiàn)液-固分離。過濾型轉鼓圓周壁上有孔,在內壁襯以過濾介質。
?、陔x心沉降:利用懸浮液(或乳濁液)密度不同的各組分在離心力場中迅速沉降分層的原理,實現(xiàn)液-固(或液-液)分離。沉降型轉鼓圓周壁無孔。典型的沉降型轉鼓。大腸桿菌分離機懸浮液(或乳濁液)加入轉鼓后,固體顆粒(或密度較大的液體)向轉鼓壁沉降,形成沉渣(或重分離液)。密度較小的液體向轉鼓中心方向聚集,流至溢流口排出,成為分離液(或輕分離液)。轉鼓均為間歇排渣,適用于含固體顆粒粒度較小、濃度較低的懸浮液或乳濁液分離;轉鼓用螺旋連續(xù)排渣,可分離固體顆粒濃度較高的懸浮液。在具有多層圓錐形碟片的轉鼓中,液體被碟片分成若干薄層,縮短了沉降分離的距離,使分離加快,改善了分離效果。